CRISPR/Cas系统分为两大类五种类型（Ⅰ-Ⅴ)，目前应用较广的CRISPR/Cas9系统为II型CRISPR系统，仅需一个Cas蛋白和两个RNA元件即可实现对靶DNA的切割。为了进一步简化CRISPR/Cas9系统，通过保留必需元件tracrRNA和crRNA的核心序列并引入连接区，将两者合并为一个sgRNA（Single guide RNA），并通过体外实验证实Cas9蛋白能在sgRNA的引导下切割双链DNA，这一系列成果为CRISPR/Cas9在基因编辑中的广泛应用奠定了坚实基础。

①简介：在植物体系中，我司目前主要使用载体

②周期：约14-21个工作日

③适用场景：

1、 功能基因的敲除；
2、 非编码区的编辑，例如对启动子、microRNA、lncRNA的基因序列进行编辑；
3、 单碱基编辑、精准碱基编辑；
4、 非同源/同源多基因敲除、代谢通路多基因敲除；
5、 大片段删除。

④结题标准：目的片段构建至目的载体上（俗称“构建成功”）。

⑤实验交付内容：

1、重组载体的全序列信息和注释信息；
2、重组载体的测序结果；
3、重组载体：一份质粒、一份大肠杆菌菌液（25%甘油菌）；
4、如果需要转化农杆菌：1份农杆菌菌液（25%甘油菌）。

1、 采用多种载体来进行sgRNA的片段组装及无缝组装，同时，对于单个、 多个sgRNA序列均可进行组装；
2、 载体资源丰富，根据您研究的物种、靶序列，均有对应经多次编辑效率测试后的最优原始载体骨架推荐，也可个性化订制您有其它需求的基因编辑载体；
3、 基因编辑载体库中有多种真核筛选标记（可选潮霉素、Basta或G418进行筛选）的原始载体可供选择，同时，多基因编辑、单碱基编辑、精准碱基编辑等特殊基因编辑系统也可满足您的特殊实验需求；
4、 多种载体可选，可应用于后期单子叶或双子叶遗传转化；
5、 可以与我司转基因服务、检测服务、蛋白服务等衔接，整个实验可以畅通且快速地完成。