泛素是一种含76个氨基酸的保守蛋白，它经常作为降解信号连接在蛋白质的N端。泛素能被其特异性的蛋白酶(ubiquitin-specific proteases, UBPs)识别并从所连接的蛋白上切割下来，切割位点总是位于泛素蛋白的C端。在酵母细胞中，泛素可以分成两部分单独表达，即其N端部分(NubI, 第1~34位氨基酸)和C端部分(Cub, 第35~76位氨基酸)，后者融合有能启动核内报告基因表达的LexA-VP16蛋白。将诱饵蛋白和猎物蛋白分别与Cub和NubG两个结构域融合，并在膜上正常表达。当诱饵蛋白和猎物蛋白存在相互作用时，由于蛋白互作使NubG和Cub在空间上接近，从而形成一个完整的泛素分子，导致细胞质侧的转录激活因子LexA-VP16被UBPs切割，游离的LexA-VP16进入细胞核，激活His3、Ade2与LacZ表达，可用相应的缺陷培养基和β-半乳糖苷酶显色试剂盒筛选有相互作用的蛋白。

①简介：在植物膜体系双杂交系统中，我司目前使用的为pBT3-N与pPR3-N载体。

②载体构建周期：约7-14个工作日

③适用场景：

1.验证已知的膜蛋白质之间是否存在特异性相互作用。

2.能够高效地筛选并鉴定出与特定膜蛋白结合的新蛋白编码基因（即膜蛋白筛库）。

3.用于鉴定分析膜蛋白间相互作用的结构域。

④结题标准：目的片段构建至目的载体上，即构建完成。

⑤实验交付内容：

1、双载体的表达核序列信息和注释信息；
2、双组载体的测序结果；
3、双组载体：一份质粒、一份大肠杆菌菌液（25%甘油菌）；

1、载体构建经验丰富，采用无缝克隆组装。极大节省您的研究时间。

2、为每个项目量身定制最优实验方案，无论是复杂蛋白序列还是特殊物种基因，我们都有信心应对。

3、建立项目专属沟通群，实验进程实时同步，数据结果清晰可溯。