技术原理

DNA拉下实验(DNA Pull-down)是体外研究DNA与蛋白互作的有效方法,可以探究DNA与转录调控蛋白质的互作,最常见的应用是验证启动子与转录因子的互作情况。DNA Pull-down将生物素标记的DNA片段结合在链霉亲和素磁珠上,形成磁珠-DNA探针复合体,再与细胞核蛋白孵育,这可以将与DNA结合的蛋白吸附在磁珠上。洗涤去除未结合及非特异性结合蛋白分子后,将与DNA结合的蛋白洗脱下来,得到DNA Pull-down产物,通过Western-blot检测DNA与已知蛋白的互作,也可以通过质谱技术鉴定与DNA片段互作的未知蛋白信息。


服务流程

服务介绍

①周期:

实验类型

实验项目

周期

DNA Pull-down-WB

DNA标记

7-10天

DNA Pull-down 富集

7-10天

DNA纯化

1-2天

WB验证

2-3天

②适用场景:

1、验证已知DNA与蛋白的互作(如启动子与转录因子的互作);

2、筛选与已知DNA相互作用的未知蛋白。

 

③结题标准:阳性对照组鉴定到目标蛋白,阴性对照组未鉴定到目标蛋白。

 

④实验交付内容:

1、实验原始图片;

2、实验报告。


服务优势

样品要求

样品类型

要求

邮寄条件

备注

质粒

(1)≥4微克

(2)浓度≥200纳克/微升

(3)OD260/280=1.6-2.0

冰袋

(1)提供测序结果

(2)标明载体抗性

种子

≥300粒(或≥150克)

冰袋

(1)提供近一年内所收的颗粒饱满的种子

(2)发芽率>90%

组织样本

(1)≥500微升

(2)OD600≥2.0

干冰

新鲜样品取完后迅速液氮冷冻


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