GFP、RFP等荧光蛋白因其独特的荧光性质和灵敏性,常作为报告基因研究并分析基因产物在细胞中的定位和相互作用等。将目标蛋白与荧光蛋白的N端或者C端融合,通过瞬时转化技术或稳定遗传转化技术,使得该融合蛋白在受体材料细胞内表达,目标蛋白会牵引荧光蛋白一起定位到目标细胞器,通过显微镜观察荧光蛋白在细胞内显示的位置,确定目标蛋白的位置,从而确定目标蛋白的亚细胞定位情况。
①周期:约7-14个工作日
②适用场景:
1、为明确基因功能提供信息;
2、推测蛋白质的生物学功能。
③结题标准:阳性对照有荧光信号。
④实验交付内容:
1、重组载体的表达核序列信息和注释信息;
2、重组载体的测序结果;
3、重组载体:一份质粒、一份大肠杆菌菌液(25%甘油菌)。
(上述3点是客户需要构建载体。)
4、图片交付标准
4.1普通定位提供四组实验组和一组阳性对照图
(含原始文件、荧光通道图、叶绿体自发荧光通道图、明场、叠加图,注:水稻原生质体、质壁分离无叶绿体自发荧光通道图);
4.2亚细胞共定位提供四组实验组和一组阳性对照图
(含原始文件、荧光通道图、marker荧光通道、叶绿体自发荧光通道图、明场、叠加图,注:水稻原生质体无叶绿体自发荧光通道图)。
1、拥有丰富的亚细胞定位载体资源,包含了基于红色荧光蛋白、黄色荧光蛋白、绿色荧光蛋白、青色荧光蛋白的载体库,方便选择使用;
2、拥有细胞核、细胞膜、液泡膜、内质网、过氧化物酶体、高尔基体、线粒体、叶绿体等多种细胞器的Marker载体,以方便共定位时选择;
3、常备水稻黄化苗和绿苗、拟南芥、小麦、大麦、烟草、玉米、谷子、紫花苜蓿等物种的原生质体以及烟草叶片,可直接开展实验项目,快速获得实验结果;
4、每个基因拍5-6个细胞,保证实验的可靠性与可重复性。
样品类型 | 要求 | 邮寄条件 | 备注 |
质粒 | (1)≥4微克 (2)≥200纳克/微升 (3)OD260/280=1.6-2.0 | 冰袋 | (1)提供测序结果 (2)标明载体抗性 |
大肠杆菌甘油菌 | (1)≥500微升 (2)OD600≥2.0 | 冰袋 | (1)提供测序结果 (2)标明菌液抗性 (3)提供活性好的菌液 |
种子 | ≥50粒 | 常温 | (1)提供近一年内所收的颗粒饱满的种子 (2)发芽率>90% |