荧光素酶互补实验（Luciferase Complementation Assay，LCA）以萤光素为底物来检测萤光素酶的活性。具体而言，生物体来源的萤光素酶催化底物萤光素发生氧化，发岀最强波长在560nm左右的生物荧光。实验中，萤光素酶蛋白被切成N端和C端2个功能片段，即NLuc和CLuc。在一个实验体系中，待检测的2个目标蛋白分别与NLuc和CLuc融合，如果2个目标蛋白相互作用，则萤光素酶的NLuc和CLuc在空间上会足够靠近并正确组装，从而发挥萤光素酶活性，即分解底物产生荧光。

①周期：

②适用场景：

1、验证蛋白质之间是否存在相互作用关系，可与酵母双杂、Co-IP等实验结果相互验证；

2、根据荧光素酶活性可以判断蛋白互作强弱。

③结题标准：阳性对照有荧光，阴性对照无荧光。

④实验交付内容：

1、重组载体的表达核序列信息和注释信息；
2、重组载体的测序结果；
3、重组载体：一份质粒、一份大肠杆菌菌液（25%甘油菌）。

(上述3点是客户需要构建载体。)

4、实验的原始照片，实验组3组图（每组含明场，荧光场，叠加场3张图），阳性对照一组图（校准实验流程）；
5、实验报告，含实验步骤和结论。

1.增加了阳性对照以确保实验流程的可靠性；

2.常备烟草叶片，可快速获得实验结果；

3.每组实验至少重复3个叶片，增加实验稳定性。