双分子荧光互补（Bimo-lecular fluorescence complementation，简称BiFC）技术巧妙地将荧光蛋白分割成两个不具有荧光活性的分子片段（N-fragment、C-fragment），将这两个荧光蛋白的片段分别融合两个目标蛋白A、B，如果A与B蛋白发生了相互作用，在空间上互相靠近，就会重新构建成完整的具有活性的荧光蛋白分子，在激发光的激发下，荧光蛋白发出荧光。反之，若A与B蛋白之间没有相互作用，则不能被激发岀荧光。

①简介：在植物体系中，我司目前主要使用p1300-SCYCEp1300-SCYNE载体

②周期：约7-14个工作日

③适用场景：

1、验证蛋白质之间是否存在相互作用，可与酵母双杂、Co-IP等实验结果相互验证；

2、对细胞内蛋白相互作用的位置进行研究。

④结题标准：阳性对照有荧光信号以及阴性对照没有荧光信号。

⑤实验交付内容：

1、重组载体的表达核序列信息和注释信息；
2、重组载体的测序结果；
3、重组载体：一份质粒、一份大肠杆菌菌液（25%甘油菌）；
(上述3点是客户需要构建载体。)
4、提供一组阳性对照图、三组阴性对照图、4-5组实验组图片（含原始文件、荧光通道图、叶绿体自发荧光通道图、明场、叠加图，注：水稻原生质体无叶绿体自发荧光通道图）；
5、阴性图不亮，阳性图。

1、增加了阳性对照系统，除了能够证明相互作用，也能证明其不相互作用。

2、常备水稻、烟草、小麦、玉米、拟南芥等的原生质体以及烟草叶片，每周定期观察，可快速获得观察结果。