免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。其原理是使用靶蛋白特异性抗体间接捕获与特定靶蛋白结合的蛋白来鉴定体内相关的蛋白-蛋白相互作用,是研究蛋白质互作的经典方法。
①周期:15个工作日,如需质谱鉴定按难易程度需要15-45个工作日
②适用场景:
1、测定两种目标蛋白质是否在体内结合;
2、鉴定与特定蛋白相互作用的未知蛋白(通常与质谱连用,也称IP-MS);
3、分离得到天然状态的相互作用蛋白复合物。
③结题标准:
1、阳性对照即Iput组有条带(且条带大小正确)
2、实验组即IP组有条带(且条带大小正确)
④实验交付内容:
1、重组载体的表达核序列信息和注释信息;
2、重组载体的测序结果;
3、重组载体:一份质粒、一份大肠杆菌菌液(25%甘油菌);
(上述3点是客户需要构建载体,且客户自身需要才提供。)
4、实验图片;
5、实验报告。
样品类型 | 要求 | 邮寄条件 | 备注 |
质粒 | ≥20微克 | 冰袋 | (1)提供测序结果 (2)标明载体抗性 |
大肠杆菌甘油菌 | ≥500微升 | 冰袋 | (1)提供测序结果 (2)标明菌液抗性 (3)提供活性好的菌液 |
种子 | ≥50粒 | 常温 | (1)提供近一年内所收的颗粒饱满的种子 (2)发芽率>90% |
植物组织 | (1)≥3克 (2)新鲜嫩绿 | 干冰 | 新鲜样品取完后迅速液氮冷冻 |
动物组织 | ≥1克 | 干冰 | 新鲜样品取完后迅速液氮冷冻 |
抗体 | Co-IP:≥30微升 WB:≥10微升 | 干冰 | 提供抗体说明书 |