双荧光素酶报告基因检测系统在细胞中同时表达荧光虫荧光素酶和海肾荧光素酶，两者可催化各自的底物发生氧化作用产生生物荧光。一般情况下，海肾荧光素酶基因作为内参使用，将两个报告基因构建到同一个质粒上，分别用不同的启动子启动其表达。

①周期：约7-14个工作日

②适用场景：

1、验证microRNA同mRNA靶向互作：将待测mRNA的3’UTR序列插入报告基因载体，再共转入该microRNA，如果荧光素酶活性下降，则提示为其靶序列。

2、验证microRNA同lncRNA靶向互作：将候选的lncRNA序列插入报告基因载体中F-Luc 3’UTR区域，检测萤光素活性。

3、启动子结构分析：将启动子区域序列（通常2k左右）进行分段截短，或对特定位点进行突变，再分别构建入荧光素酶报告载体，检测其启动子活性。

4、启动子SNP分析：一些基因的启动子区域存在单核苷酸多态性，可运用萤光素酶报告系统分析其相对活性。

5、验证特定转录因子同其调控序列的作用：将该序列（通常为启动子区域）插入报告基因载体，同时在实验细胞中共转其转录因子，可分析转录因子是否提高萤光素酶活性。

6、转录因子转录调控活性；

7、验证启动子活性：将待测启动子构建至荧光素酶基因的上游，检测启动子的活性。

③结题标准：阳性对照组表达正常、有明显差异且海肾值过万（或者海肾值达到104以上范围）。

④实验交付内容：

1、重组载体的表达核序列信息和注释信息；
2、重组载体的测序结果；
3、重组载体：一份质粒、一份大肠杆菌菌液（25%甘油菌）。

(上述3点是客户需要构建载体。)

4、测值实验：3组生物重复数据，加阳性对照组；拍照实验：3组实验组原始图片，加1组阳性对照组。

1、常备水稻、烟草、拟南芥等物种的原生质体以及烟草叶片，可快速获得实验结果；

2、可增设预实验检测启动子活性；

3、增加了阳性对照以确保实验流程的可靠性；

4、体内实验，更加真实反馈植物体内的互作情况。