凝胶迁移实验又称凝胶阻滞实验或电泳迁移率实验(Electrophoretic Mobility Shift Assay,EMSA),基于蛋白-探针复合物在凝胶电泳过程中比对照组迁移更慢的原理,用于检测蛋白与核酸相互作用的技术。根据实验设计特异性和非特异性探针,当核酸探针与蛋白样本混合孵育时,样本中可以与核酸探针结合的蛋白质与探针形成蛋白-探针复合物,这种复合物由于分子量大,在进行PAGE电泳时迁移较慢,而没有结合蛋白的探针则迁移较快。孵育的样本在进行PAGE电泳并转膜后,蛋白-探针复合物会在膜靠前的位置形成一条带,说明有蛋白与目标探针发生互作。
①周期:
实验名称 | 周期 |
生物素标记探针的设计与制备 | 7-14天 |
蛋白提取 | 14天 |
EMSA凝胶电泳迁移检测 | 7-14天 |
②适用场景:
1、用于研究DNA结合蛋白和特定的DNA序列的相互作用;
2、可用于DNA定性和定量分析;
3、用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。
③结题标准:阳性对照有条带以及阴性对照无条带。
④实验交付内容:
1、重组载体的表达核序列信息、注释信息、测序结果;
2、重组载体:一份质粒、一份大肠杆菌菌液(25%甘油菌);
(上述2点是客户需要构建载体,且客户自身需要才提供。)
3、探针设计合成信息;
4、实验图片:原始蛋白纯化考染图及WB结果图;
5、实验报告。
1、多类型实验覆盖。提供验证型、竞争型、超迁移型EMSA,可满足从基础验证到特异性验证实验的全流程需求。
2、严格质控体系确保实验结果可靠。实验设置冷探针竞争、突变探针对照等多重对照组,确保实验结果特异性。
3、全流程技术支持。售前提供专业技术方案,售中及时更新项目进度,售后全程解答客户疑问,确保全流程无忧。
样品类型 | 要求 | 邮寄条件 | 备注 |
质粒 | (1)≥4微克 (2)≥200纳克/微升 (3)OD260/280=1.6-2.0 | 冰袋 | (1)提供测序结果 (2)标明载体抗性 |
大肠杆菌甘油菌 | (1)≥500微升 (2)OD600≥2.0 | 冰袋 | (1)提供测序结果 (2)标明菌液抗性 (3)提供活性好的菌液 |