大肠杆菌原核表达系统是迄今为止最为成熟可靠的蛋白表达系统之一,能快速表达不同种属来源的外源基因。通过对需要表达的外源基因的DNA序列进行密码子优化以及对表达载体、表达菌株、培养条件和诱导时间等各种因素的综合测试,实现外源基因在大肠杆菌内的表达。表达的重组蛋白经纯化后可用于相应的生物学研究。
①周期:
服务项目 | 周期 |
基因合成 | 7-14天 |
载体构建 | 7-14天 |
表达评估 | 7-14天 |
蛋白表达及纯化 | 7-14天 |
②适用场景:
1、重组蛋白制备与纯化:适用于高效表达可溶性蛋白、带标签融合蛋白,满足结晶研究、抗体生产、抗原制备及工业酶制剂的大规模生产需求。
2、蛋白质结构与功能分析:用于表达特定结构域或突变体,解析蛋白-蛋白相互作用、酶活特性及靶点活性,支持结构生物学和功能机制研究。
3、蛋白质定位分析:通过荧光标记(如GFP融合蛋白)或信号肽分析,研究蛋白质在细胞内的分布特征及转运机制。
③结题标准:蛋白纯度大于85%。
④实验交付内容:
1、重组载体的表达核序列信息和注释信息;
2、重组载体的测序结果;
3、重组载体:一份质粒、一份大肠杆菌菌液(25%甘油菌)。
(上述3点是客户需要构建载体。)
4、纯化蛋白以及详细的实验报告;
5、蛋白纯度85%,交付1mg蛋白。
1、标签种类多。
2、蛋白表达纯度高。
3、实验报告详细。
样品类型 | 要求 | 邮寄条件 | 备注 |
质粒 | (1)≥4微克 (2)≥200纳克/微升 (3)OD260/280=1.6-2.0 | 冰袋 | (1)提供测序结果 (2)标明载体抗性 |
大肠杆菌甘油菌 | (1)≥500微升 (2)OD600≥2.0 | 冰袋 | (1)提供测序结果 (2)标明菌液抗性 (3)提供活性好的菌液 |